逆转录病毒包装

逆转录毒包装

逆转录病毒是一类RNA病毒。在逆转录酶的作用下,以病毒RNA为模板合成cDNA,再通过DNA复制、转录、翻译等过程形成病毒颗粒。

逆转录病毒来源于可感染人和小鼠细胞的 Moloney鼠白血病病毒(Mo-MLV)。逆转录病毒载体的最显著的优势在于它们能将单链RNA (ssRNA)基因组转换为dsDNA分子,以便稳定地整合到宿主基因组中。逆转录病毒表达系统是一种新的重组蛋白高效表达系统,由逆转录表达载体、辅助载体(表达病毒包装需要的蛋白质)和包装细胞系组成。由于逆转录病毒载体具有基因组结构简单,便于基因操作、转染效率高、宿主范围广、易于分离等优点,因此在外源基因表达、基因沉默、基因治疗、生物制药等方面得到了广泛应用。 

一、逆转录病毒载体系统组成:
1、一个含有目的基因的表达载体;
2、一个编码VSV-G 的辅助质粒;
3、表达gag/pol 的辅助质粒;
4、293T 包装细胞。

二、逆转录病毒载体系统优势:
1、转导效率高,能够有效提高基因的转染率;
2、相对于腺病毒来说,能够稳定整合到细胞的基因组中,能够稳定遗传。

三、逆转录病毒包装流程:

1、获取目的基因片段;

2、构建逆转录病毒表达载体;

3、逆转录病毒包装及其纯化;

4、逆转录病毒滴度的测定

四、慢病毒、腺病毒、逆转录病毒三者之间的比较


五、服务流程:


六、服务项目


分子生物学类蛋白质与免疫学动物实验
实时荧光定量PCR单克隆抗体制备