蛋白质原核表达和真核表达实验技术对外服务

 

蛋白质原核表达和真核表达实验技术对外服务

简介:

随着蛋白药物市场的快速发展和蛋白质组学研究的深入,高纯度活性蛋白的需求越来越大。威斯腾生物中心组建了一支由多名具深厚生物技术基础与制药企业工作经验的留学归国人员和国内专家为核心的团队。可为国内外客户提供从基因到蛋白纯化的整套技术服务。

服务特色:

稳定而多样的表达系统:威斯腾生物已建立整套的基因克隆与表达体系,无论是单个基因的克隆、表达与纯化,还是多个基因高通量的基因克隆、表达和纯化,均能选用适合您试验(科研项目)需要的表达系统(包括大肠杆菌、毕赤酵母、昆虫杆状病毒以及哺乳动物细胞等)和合适的表达载体为您提供优质的服务。

多种纯化方式:可为客户提供多种蛋白纯化服务,纯化方式包括亲和层析纯化、凝胶过滤、离子交换、疏水层析等,客户可根据需要选择合适的纯化方式。

专业的团队和良好的信息管理体系:专业的基因克隆、蛋白表达与纯化技术人员与团队,具有丰富的表达和纯化经验,可为客户解决各种瓶颈问题, 良好信息管理体系使我们能够为客户提供成熟、高效的基因克隆服务。

实验流程

大肠杆菌和酵母蛋白表达系统:

1、中心合成基因(另外收费)或者客户提供模板(cDNA、基因组DNA、质粒等)

2、构建表达载体

3、筛选阳性克隆

4、表达优化和可溶性分析

5、SDS-PAGE检测表达

6、Western blot检测表达(可选)


昆虫杆状病毒蛋白表达系统:

1、合成基因(另外收费)或者客户提供模板(cDNA、基因组DNA、质粒等)

2、构建表达载体

3、重组和筛选阳性克隆

4、提取重组Bacmid

5、感染Sf9细胞制备重组病毒

6、病毒滴度测定

7、优化表达条件和细胞株(蛋白表达优化一步需要)

8、Western blot检测蛋白表达


哺乳动物细胞瞬时表达小试

1、合成基因(另外收费)或者客户提供模板(cDNA、基因组DNA、质粒等)

2、构建表达载体

3、瞬时转染HEK293等哺乳动物细胞

4、Western blot检测(特异性一抗需客户提供)

5、表达优化

6、如果目的蛋白有表达,从50ml细胞培养液中纯化目的蛋白


哺乳动物细胞稳定表达细胞株建立

1、合成基因(另外收费)或者客户提供模板(cDNA、基因组DNA、质粒等)

2、构建表达载体

3、稳定转染细胞

4、Western blot检测检测(特异性一抗需客户提供)

5、如果目的蛋白有表达,转染细胞后筛选稳定表达细胞株

提供结果:

1、构建的表达载体及测序报告

2、SDS-PAGE结果

3、筛选的表达菌株

4、Western blot结果

5、实验流程及结果

6、2ml 1.0×108pfu/ml的病毒(利用昆虫杆状病毒蛋白表达系统表达时)

稳定表达细胞株(哺乳动物细胞)

 

完成时间:1个月左右



【本平台合作项目】

分子诊断、病理诊断、药效学评价、毒理学实验、细胞药筛、动物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因编辑、病理检测、基因芯片、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIPCO-IP、生物信息学分析、知识产权服务!

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