药物毒性检测

药物毒性检测

     新的化合物可能引起各类组织器官的毒性损伤,这些毒性可以在相应的细胞模型中进行早期检测,为药物研发提供重要参考资料。

     威斯腾生物以科技服务为起点,拥有完善的基础实验平台、先进的实验设备、专业的技术团队、标准的操作流程、优质的合作平台和强大的科学家网络,为国内外科研工作者和机构提供专业的科研技术合作和转化服务指导。能够为客户提供全面的药物毒性检测服务,通过高通量/高内涵毒性筛选MTT/cck8等方法,去检测药物的毒性,包含了肝脏毒性、心脏毒性、肾毒性等

药物毒性检测方法:

高内涵/高通量筛选

   高内涵筛选(HCS)是一套自动化分析方法,利用整合的显微镜、图像处理技术及可视化工具从细胞或细胞群中提取数据,获得定量分析结果。HCS一般应用于高通量的样品荧光成像,提供定量分析结果。此外,HCS能够结合单个细胞的多重检测结果,同时分析单次实验中的多个细胞亚群。

   高通量筛选(HTS)是以微板形式作为实验工具载体,以自动化操作系统执行试验过程,同一时间检测数以千万的样品,并得到的相应数据库支持运转,具有微量、快速、灵敏、准确的特点。

MTT/CCK8检测

    MTT为黄色化合物,是一种接受氢离子的染料。活细胞在琥珀酸脱氢酶和细胞色素c的作用下四唑环开裂,生成蓝色的甲月替结晶并沉积在细胞中,甲月替结晶的生成量仅仅与活细胞数目成正比(死细胞中的琥珀酸脱氢酶消失,不能还原MTT)。还原生成的甲月替结晶可在含50%的N,N-二甲基甲酰胺、20%的十二甲基磺酸钠(PH 4.7)或10%酸化十二甲基磺酸钠(PH 4.7)的溶液中溶解。利用酶标仪测定490nm波长处的光密度测出OD值,即反映活细胞数目。也可利用DMSO(二甲基亚砜)来溶解。用DMSO之前要尽量去掉培养液,一遍DMSO溶解甲月替颗粒,进行比色测定。

     CCK-8(cell-counting kit-8)检测试剂盒是应用WST-8取代MTT被还原,WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。且WST-8相较XTT和MTS化学性状更稳定, 因此实验结果相对更加稳定。此外,WST-8相较MTT、XTT,线性范围相对宽,灵敏度更高。 

当细胞增殖得越多越快,则formazan产生量越多,颜色越深;反之,当内外因造成的细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。应用酶标仪测定吸光值并进行统计学计算便可以获得细胞增殖(活性)相关数据。

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