ELISA检测

                   

ELISA(酶联免疫吸附法)技术服务


◇服务内容

您只需将需要检测的动物(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Pig,Monkey……)种类和检测指标(介素类、因子类)及标本数量(48T/96T)告知我司业务人员即可。在接到客户标本当日起,3周内将检测报告交到客户手中!


◇质量保证

我公司提供的检测用所有试剂,适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本,灵敏度极高,多年专业酶免服务,我们保证对所售任何产品一概负责到底,每一份实验结果都真实可靠!


◇注意事项

在收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,及时储存在4备用,如有特殊原因需要周期收集标本,请造模取材后,将标本及时分装后放在-20-70条件下保存。因冰室与室温存在一定温差,蛋白极易降解,直接影响实验质量,所以避免反复冻融。代测放免标本的客户取材前须向我司销售人员索要说明书,具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。


◇液体类标本

包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
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血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
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血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
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尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
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细胞培养上清:
    检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBSPH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
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组织标本:
    切割标本后,称取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8的温度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。


ELISA实验步骤

1.包被抗原:稀释液pH 9.6 碳酸盐缓冲液,多肽浓度2ug/ml0.1ml/孔,4ºC过夜,洗净。
2.1%BSA (pH 9.6 
碳酸盐缓冲液封闭,0.1ml/孔,37ºC1h,洗净。
3.
稀释抗血清(可稀释不同浓度) 0.1ml/孔,37ºC 30分钟,洗净。
4.
稀释辣根过氧化物每标记的二抗 0.1ml/孔,37ºC 40分钟,洗净。
5.
显色:TMB显色
A
液:四甲基联苯胺10mg 溶于DMF1ml中,再用pH5.0柠檬酸缓冲液稀释100.
B
液:5ul双氧水加蒸馏水12.5ml 
终止液:2N硫酸


威斯腾服务流程:


【本平台合作项目】

分子诊断、病理诊断、药效学评价、毒理学实验、细胞药筛、动物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因编辑、病理检测、基因芯片、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIPCO-IP、生物信息学分析、知识产权服务!

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