miRNA/ lncRNA 敲除细胞系

CRISPR /Cas9 miRNA、lncRNA 敲除细胞系


产品介绍

基因敲除敲入技术一直是研究特定基因功能的有效工具。威斯腾生物利用最新的CRISPR/Cas系统可以有效的实现对细胞系特定基因的敲除和定点突变。

近10年来,mRNA在医学应用领域取得显著进展。研究人员可快速合成任意序列的mRNA片段,并能保存在室温条件下。在无细胞的体系中利用DNA转录生成cappoly A修饰的mRNA分子稳定性良好,而修饰碱基的mRNA在稳定性上更获得大幅提升。在研究基因敲除动物及其胚胎发育中的基因表达时,科研人员往往都采用卵母细胞的mRNA显微注射的方法,该方法在ZFNTALENCRISPR、重编程细胞多能性等技术中得到广泛应用。在这些基因编辑过程中使用mRNA较之DNA有诸多优点,例如无需进入核内并转录效率更快,RNA易降解也避免基因组遗传重组现象。

我们利用该技术,定点敲除和修饰各种细胞系中的特定基因。对打靶细胞进行药物筛选,利用CRISPR/Cas系统获得的基因敲除细胞的剔除效率会明显高于常规的利用RNAishRNA介导的基因敲落。


技术特色

1.可实现多个靶基因位点及多个基因的同时敲除
2.最新Nickase/gRNA技术,显著降低脱靶率
3.无种属限制,适用于各种细胞系的靶向敲除


操作流程

靶向目标序列sgRNA的设计及载体构建

目标细胞系共转染

阳性细胞株的筛选和鉴定


应用范畴

基因功能分析:在细胞水平研究基因的功能

定点突变:建立点突变细胞,可用于药物靶点研究。

启动子功能分析:该方法建立的启动子分析系统,可有效地分析内源性启动子的强度,是一种最理想的分析系统。


参考细胞系

肿瘤细胞系: BEL-7402人肝癌细胞  CNE人鼻咽癌细胞  Hela人宫颈癌细胞  MCF-7人乳腺癌细胞等

神经细胞系:SK-N-SH人神经母瘤细胞

卵巢细胞系:SK-OV-3人卵巢癌细胞

血管平滑肌细胞系:VSMC血管平滑肌

成纤维细胞系:包皮成纤维细胞,心肌成纤维细胞

肺细胞系:SK-MES-1人肺鳞癌细胞  NCI-H460人大细胞肺癌细胞 A549人非小细胞肺癌细胞

肾细胞系:NRK肾小球足细胞

巨噬细胞:MH-S小鼠肺泡巨噬细胞 RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞  THP-1人单核巨噬细胞

内皮细胞:HUVEC人脐静脉内皮细胞

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具体CRISPR /Cas9细胞建系技术定制服务,欢迎联系我们


威斯腾实验服务流程



威斯腾生物服务项目

分子生物学检测蛋白质与免疫学动物实验
实时荧光定量PCR单克隆抗体制备帕金森疾病模型
免疫共沉淀(Co-IP多克隆抗体制备抑郁症动物模型
ELISA(酶联免疫吸附法)技术Western-blot 实验服务脊髓损伤模型
生化指标检测蛋白双向电泳实验服务脑外损伤模型
双荧光素酶报告基因检测原核蛋白表达纯化骨神经损伤模型
染色质免疫共沉淀(ChIP真核蛋白表达纯化心肌缺血模型
GST pull DownITRAQ定量蛋白质组学心力衰竭模型
SLAC蛋白组学肺动脉高血压动物模型
高血压模型
病毒包装实验课题整体外包粥样动脉硬化模型
过表达/干扰慢病毒包装纯化整体课题外包大脑中动脉阻塞模型
过表达/干扰腺病毒包装纯化细胞整体实验外包慢性之气管炎模型
逆转录病毒包装纯化动物整体实验外包过敏性哮喘模型
腺相关病毒包装纯化肺炎大鼠模型