激光共聚焦

   

   激光共聚焦显微镜


一、激光共聚焦显微镜

激光扫描共聚焦显微镜是采用激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置,并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。主要系统包括激光光源、自动显微镜、扫描模块(包括共聚焦光路通道和针孔、扫描镜、检测器)、数字信号处理器、计算机以及图象输出设备(显示器、彩色打印机)等。通过激光扫描共聚焦显微镜,可以对观察样品进行断层扫描和成像。因此,可以无损伤的观察和分析细胞的三维空间结构。同时,通过激光扫描共聚焦显微镜也是活细胞的动态观察、多重免疫荧光标记和离子荧光标记观察的有力工具。


仪器名称:激光共聚焦显微镜

英文名:Leica TCS SP2 AOBS

型号与规格:TCS SP2 AOBS


二、激光共聚焦显微镜组成

1、共聚焦扫描系统
1)独立双向扫描镜。可以在正置显微镜和倒置显微镜之间迅速互换。仪器永久不用校正;可调的计算机控制单共焦针孔、孔径20600μm
2)光谱扫描区400850nm
3)单线扫描频率≥2000线/
4)图扫描率≥3/512×512pixels;≥20/512×32pixels
5)扫描分辨率4096*4096扫描放大132X;多方位序列扫描方式;任意形状区域扫描-范围:≥22mm
6)光谱斜陡率  1
7)透射光检测器用于微分干涉相衬法检验
8)低噪音 冷却型光电倍增管(PNT)控测器12bi
2
、激光装置
具有多通道AOTF(四通道,八谱线),连接四种不同波长的可见光激光可以自动选择激光谱线和功率,具等待功能。光纤耦合连接低能量激光。目前使用五激光,八谱线。Ar激光发生器 458nm/5mw476nm/5mw488nm/20mw514nm/20mw-蓝;He/Ne激光发生器(543nm/1.2mw-绿;He/Ne激光发生器(633nm/10mw594nm/2mv-红,紫外激光发生器(405nm/25mv
3
、显微镜:DMIRE2倒置电动荧光显微镜,拥有10x20x40x干镜以及63x100x油镜。配置电动编码物镜转座,Z轴电动驱动和干涉相衬的编码棱镜转轮。
4
、计算机工作站
WindowsXP
操作系统,8个同步接收器通道,12bit同步数字转换,超宽的SCSI电脑介面,高性能的电脑工作站,两个监视器,计算机彩色显示


主要附件和功能:

观察细胞精细结构。用于检测各种染色,非染色和荧光标记的组织和细胞等,在可见光范围内荧光的定位定量分析,组织光学切片,基因染色体定位,基因亚细胞定位,离子通道研究.

 

三、检测的优势

    与传统光学显微镜相比,主要解决了生物样品结构相互重叠影响观察的问题,并可形成清晰的三维图象。在检测方面的主要优势有:

    1、对活细胞和组织或细胞切片进行连续扫描,可获得精细的单个或一群细胞或者观察到局部组织的各个层面结构(包括细胞特异结构细胞骨架、染色体、细胞器和细胞膜系统,样品的深层结构)的三维图像。

    2、细胞内离子荧光标记,单标记或三奈记,检测细胞内如PH和钠、钙、镁等离子浓度的比率测定及动态变化。

    3、荧光标记探头标记的活细胞或切片标本的活细胞生物物质,膜标记、免疫物质、免疫反应、受体或配体,核酸等观察;可以在同一张样品上进行同时多重物质标记,同时观察;

    4、荧光检测快、激发光强度精确控制、光漂白和荧光淬灭作用小;

    5、对细胞检测无损伤、精确、准确、可靠和优良重复性;数据图象可及时输出或长期储存。


四、样品要求

样品制备无特殊要求;各种染色、非染色、荧光标记的组织(包括活组织)、培养细胞、粘附细胞、细胞涂片、石蜡切片、冰冻切片。


五、应用领域

1、细胞生物学:细胞结构、细胞骨架、细胞膜结构、流动性、受体、细胞器结构和分布变化、细胞凋亡; 

2、生物化学:酶、核酸、FISH(荧光原位杂交)、受体分析

3、药理学:药物对细胞的作用及其动力学;

4、生理学:膜受体、离子通道、细胞内离子含量、分布、动态;

5、遗传学和组胚学:细胞生长、分化、成熟变化、细胞的三维结构、染色体分析、基因表达、基因诊断;

6、神经生物学:神经细胞结构、神经递质的成分、运输和传递、递质受体、离子内外流、 神经组织(如大脑皮质)结构、细胞分布;

7、微生物学和寄生虫学:细菌、寄生虫形态结构(表面和内部结构);

8、病理学及病理学临床应用:活检标本的快速诊断、肿瘤诊断、自身免疫性疾病的诊断,HIV,宫颈上皮细胞涂片诊断;

9、生物学、免疫学、环境医学和营养学;


六、服务流程 



【本平台合作项目】

分子诊断、病理诊断、药效学评价、毒理学实验、细胞药筛、动物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因编辑、病理检测、基因芯片、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIPCO-IP、生物信息学分析、知识产权服务!

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