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CRISPR/Cas9靶向基因改造(敲除、敲入)技术是最新发展起来的一种强有力的基因组编辑工具。CRISPR技术的效率相较于TALEN技术要高得多,且可以一次性的对多个基因同时进行敲除和/或敲入。现已广泛用于各类动植物个体或细胞基因组的遗传学改造。

威斯腾生物CRISPR/Cas9基因编辑团队成立于2011年,目前拥有TALEN/CRISPR/Cas9技术完成细菌基因的敲除/敲入、细胞基因的敲除/敲入、动物个体(大小鼠、猪等模式动物)的基因敲除/敲入等先进技术手段,曾为全国各科研院所及中科院系统提供CRISPR/Cas9技术相关服务,完成40余例动物个体基因敲除。威斯腾生物战略合作平台——美国国立卫生研究院(National Institutes of HealthNIH),团队成员曾于Nature等国际一流科研杂志发表大量CRISPR/Cas9相关研究成果。


技术优势

基因定点编辑技术优势

应用方向

1、靶向基因沉默    2、 体外DNA/RNA分子的位点特异性切割    3、基因定点突变    4、模式动物/细胞株改造


案  例

CRISPR/Cas9基因敲入小鼠模型

根据基因序列设计合成sgRNA,针对Knockin插入点或点突变位置构建含Knockin片段或点突变的同源序列,与Cas9 mRNA共同注射到小鼠受精卵胞质,Cas9核酸酶、sgRNA、基因组靶序列结合并切割双链DNA,以含Knockin的同源序列为模版修复基因组DNA,最终获得在目的DNA序列插入Knockin片段或点突变的Knockin小鼠。

CRISPR/Cas9基因敲除动物

根据基因序列设计合成两个sgRNA,分别针对两个Loxp的插入点,构建含Loxp的同源序列,与Cas9 mRNA共同注射到小鼠受精卵胞质,Cas9核酸酶、sgRNA、基因组靶序列结合并切割双链DNA,以含Loxp同源序列为模版修复基因组DNA,最终获得在待敲除目的DNA序列两端各有一个LoxP序列的Flox小鼠。

CRISPR/Cas9基因敲除动物