在线客服
在线客服
服务时间:08:30~17:30
客服热线
400-675-6758
客服服务热线
关注微信

威斯腾公众号

CRISPR/Cas9细胞敲除/入
CRISPR /Cas9基因敲入细胞系

时间:2020-07-17 16:40:00 浏览:668次


稳定细胞系在重组蛋白制备、抗体制备、药物筛选、基因功能研究及其它方面起着重要作用。稳定细胞系能持续生长,并持续稳定表达外来基因。根据研究或应用方向,可通过改变插入的拷贝数及启动子活性,调控外源基因在靶细胞的表达水平,使其升高、降低、或与靶细胞内源基因表达量相等。外源基因的插入方式可分为随机插入,或插入定点位置。

威斯腾生物现为广大研究者提供稳定细胞系构建服务,使用最先进技术水平,为您提供高质量的稳定细胞系。构建服务可使用复能基因提供的 CHO、HEK293、Hela、NIH3T3等工具细胞,也可使用客户指定的特定细胞系。从克隆构建、细胞系建立、基因扩增、单克隆筛选、细胞系鉴定、到功能研究,全方位的实验选择可满足研究者对蛋白表达、基因沉默等多种科研需求。


选择威斯腾生物哺乳动物稳定细胞系构建服务,您可以:

1)自由选择基因插入方式

2)自由选择克隆载体

3)自由选择靶细胞系

4)自由选择扩增基因或调整蛋白表达量

基因敲入技术一直是研究特定基因功能的有效工具。威斯腾生物利用最新的CRISPR/Cas系统可以有效的实现对细胞系特定基因的敲入。

我们利用该技术,定点敲入各种细胞系中的特定基因。对打靶细胞进行药物筛选,利用CRISPR/Cas系统获得的基因敲入细胞的剔除效率会明显高于常规的利用RNAi和shRNA介导的基因敲落。


技术特色

1、可实现多个靶基因位点及多个基因的同时敲入
2、最新Nickase酶/双gRNA技术,显著降低脱靶率

3、无种属限制,适用于各种细胞系的靶向敲入


操作流程

靶向目标序列sgRNA的设计及载体构建

目标细胞系共转染

阳性细胞株的筛选和鉴定


参考细胞系

肿瘤细胞系: BEL-7402人肝癌细胞 CNE人鼻咽癌细胞 Hela人宫颈癌细胞 MCF-7人乳腺癌细胞等

神经细胞系:SK-N-SH人神经母瘤细胞

卵巢细胞系:SK-OV-3人卵巢癌细胞

血管平滑肌细胞系:VSMC血管平滑肌

成纤维细胞系:包皮成纤维细胞,心肌成纤维细胞

肺细胞系:SK-MES-1人肺鳞癌细胞 NCI-H460人大细胞肺癌细胞 A549人非小细胞肺癌细胞

肾细胞系:NRK肾小球足细胞

巨噬细胞:MH-S小鼠肺泡巨噬细胞 RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 THP-1人单核巨噬细胞

内皮细胞:HUVEC人脐静脉内皮细胞

......

具体CRISPR /Cas9细胞建系技术定制服务,欢迎联系我们。


威斯腾实验服务流程




威斯腾生物服务项目


分子生物学检测 蛋白质与免疫学 动物实验
实时荧光定量PCR 单克隆抗体制备 帕金森疾病模型
免疫共沉淀(Co-IP 多克隆抗体制备 抑郁症动物模型
ELISA(酶联免疫吸附法)技术 Western-blot 实验服务 脊髓损伤模型
生化指标检测 蛋白双向电泳实验服务 脑外损伤模型
双荧光素酶报告基因检测 原核蛋白表达纯化 骨神经损伤模型
染色质免疫共沉淀(ChIP 真核蛋白表达纯化 心肌缺血模型
GST pull Down ITRAQ定量蛋白质组学 心力衰竭模型
SLAC蛋白组学 肺动脉高血压动物模型
高血压模型
病毒包装 实验课题整体外包 粥样动脉硬化模型
过表达/干扰慢病毒包装纯化 整体课题外包 大脑中动脉阻塞模型
过表达/干扰腺病毒包装纯化 细胞整体实验外包 慢性之气管炎模型
逆转录病毒包装纯化 动物整体实验外包 过敏性哮喘模型
腺相关病毒包装纯化 肺炎大鼠模型
肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片 原代细胞培养 肝纤维化模型
细胞因子芯片 骨髓间充质干细胞培养 胆结石模型
BioPlex悬浮芯片 脂肪干细胞培养 急性胰腺炎模型
生长因子芯片 心肌成纤维细胞培养 急性肾衰竭模型
炎症因子芯片 软骨细胞培养 体内血栓模型
血管生成因子芯片 血管内皮细胞培养 关节炎模型
凋亡因子芯片 神经元细胞培养 I型和II型糖尿病模型
趋化因子芯片 内皮组细胞原代培养 裸鼠成瘤
HuProt TM 20K人类蛋白组芯片 基因编辑动物
电生理相关服务 动物整体实验服务
膜片钳实验
细胞生物学检测 高通量测序 代谢组学
细胞原代培养 mRNA测序 气相色谱GC/MS
MTT检测 LncRNA测序 液相色谱LC/MS
细胞凋亡检测 全基因组测序 核磁共震NMR
细胞周期检测 RNA-Seq测序
细胞克隆形成实验 外显子测序 影像学相关实验
Transwell细胞迁移/侵袭 16s扩增子测序 Micro-CT
流式分选 Small RNA测序 小动物活体成像
CCK8/XTT检测 宏基因组测序 核磁共振
台盼蓝检测细胞活性 单细胞测序 PET-CT
药物筛选细胞学实验 circleRNA测序
细胞粘附性检测 甲基化测序 基因编辑动物
细胞划痕实验 条件性敲除小鼠/大鼠
细胞生物学整体实验 全基因敲除小鼠/大鼠
细胞成管实验
病理检测 CRISPR/Cas9细胞敲除/敲入 基因芯片
扫描电镜 基因定点突变细胞系 LncRNA芯片
透射电镜 单基因敲除细胞系 miRNA芯片
HE染色 多基因敲除细胞系 mRNA芯片
免疫组化 目的基因敲入细胞系 甲基化芯片(限人和小鼠来源样本)
Tunel(原位末端凋亡法)检测 报告基因敲入细胞系 SNP芯片(限人和小鼠来源样本)
激光共聚焦 miRNA/LncRNA敲除细胞系
免疫荧光
Masson染色 CRISPR/Cas9动物敲除/敲入 科研设计指导&文章评估/润色
原位杂交 基因敲除大鼠/小鼠 科研文献论著翻译
荧光原位杂交 基因敲入大鼠/小鼠 论文翻译润色服务
特殊染色(PSA、茜素红、阿尔新蓝等) 临床实验/科研实验设计方案指导
行为学检测 药物筛选服务项目 药效学评价
旷场实验 高通量自动药物筛选平台 抗肿瘤药物药效学评价
重复性刻板行为检测 细胞高内涵药物筛选平台 心血管系统药物药效学评价
动物跑台检测 蛋白质组学靶标研发平台 泌尿系统药物药效学评价
强迫游泳 分子药理研究平台 内分泌系统药物药效学评价
生物膜片钳药物筛选平台 抗炎免疫药物药效学评价
常规药物体外筛选

【本平台合作项目】
分子生物学、细胞生物学、基因敲出/入、模式动物、SPF动物保种、病理学检测、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、SiRNA与纳米载药、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务!
【全国免费热线】400-675-6758
【电话】 023-65316016,023-65316556
【邮箱】 china-western@163.com
【官网网址】www.cqwestern.com
【地址】 重庆市高新区二郎创业大道高科创业园D栋2楼