时间:2021-01-05 16:57:00 浏览:2524次
人类疾病的动物模型在医学科学研究方面占有十分重要的地位。威斯腾生物动物中心经过十余年的发展,累积了丰富的动物培养和模型构建经验,在动物模型构建方法上摸索出独有经验,常规动物模型构建平均成功率98%以上,重难点模型(开胸/开颅术等)构建平均成功率75%以上,形成了高效高质量的动物模型构建方法库,可成功构建上百种疾病动物模型。
大鼠MCAO模型构建
动物适应性喂养
动物自购回后保持动物房12h-12h昼夜交替,保持动物自由饮水、进食,温度23-25℃,适应性喂养一周后进入实验。
大鼠MCAO模型构建
参照改良Zea Longa线栓法构建大鼠MCAO模型。大鼠术前12h禁食不禁水。
大鼠称重,7%水合氯醛(0.5ml/100g)腹腔注射麻醉,颈前部备皮、消毒,行颈正中切口,钝性分离右侧皮下组织及肌肉暴露出颈总动脉,眼科镊小心分离伴行于颈总动脉的迷走神经及动脉周围粘膜组织,分离出颈总动脉大约1~1.5cm。继续向头部分离,小心剔除覆盖于动脉上方的粘膜组织,可见颈外动脉、颈内动脉与颈总动脉呈“Y字形”分布,游离出独立的颈内、外动脉。结扎颈外动脉及颈总动脉近心端,颈内动脉埋线并用动脉夹暂时夹闭。在颈总动脉近心端结扎处剪一“V”形切口,用眼科镊夹持栓线由颈总动脉进入颈内动脉,到达动脉夹时,将埋线稍微拉紧(防止渗血),松开动脉夹,继续插入栓线,当特制栓线黑色标记处到达Y字形分叉口附近时,此时栓线已进入大脑中动脉且不能继续前行。
栓线插入完毕后,将预留的结扎线拉紧固定。医用棉签清理颈部血块,缝合皮肤,酒精棉球消毒,将大鼠放回笼子。90min过后,麻醉大鼠,颈部消毒,打开一个小口,用眼科镊夹住栓线固定处将栓线拔出约1cm实现血流再灌注,剪去多余栓线,逐层缝合。
注意事项:
SD大鼠颅脑损伤模型(Feeney 自由落体法)
实验鼠称重,7%水合氯醛麻醉(5ml/kg),头部备皮,俯卧固定于颅脑损伤仪上。手术区酒精棉球消毒,将大鼠头顶部皮肤矢状切开,剥离筋膜。以人字缝前3mm、冠状缝右侧3mm为圆心用颅骨钻钻孔并扩大骨窗(直径5mm),钻孔过程需注意不能损坏硬脑膜,将致伤撞垫轻轻置于骨窗中央的硬脑膜上,用40g的砝码自20cm高处沿滑杆自由落体落下打击撞垫(冲击力为800g·cm),造成大鼠右顶叶局限性脑挫裂伤。骨蜡封窗,缝合头皮。
分子生物学检测 | 蛋白质与免疫学 | 动物实验 |
实时荧光定量PCR | 单克隆抗体制备 | 帕金森疾病模型 |
免疫共沉淀(Co-IP) | 多克隆抗体制备 | 抑郁症动物模型 |
ELISA(酶联免疫吸附法)技术 | Western-blot 实验服务 | 脊髓损伤模型 |
生化指标检测 | 蛋白双向电泳实验服务 | 脑外损伤模型 |
双荧光素酶报告基因检测 | 原核蛋白表达纯化 | 骨神经损伤模型 |
染色质免疫共沉淀(ChIP) | 真核蛋白表达纯化 | 心肌缺血模型 |
GST pull Down | ITRAQ定量蛋白质组学 | 心力衰竭模型 |
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SLAC蛋白组学 | 肺动脉高血压动物模型 |
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高血压模型 |
病毒包装 | 实验课题整体外包 | 粥样动脉硬化模型 |
过表达/干扰慢病毒包装纯化 | 整体课题外包 | 大脑中动脉阻塞模型 |
过表达/干扰腺病毒包装纯化 | 细胞整体实验外包 | 慢性之气管炎模型 |
逆转录病毒包装纯化 | 动物整体实验外包 | 过敏性哮喘模型 |
腺相关病毒包装纯化 |
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肺炎大鼠模型 |
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肝炎-肝硬化-肝癌模型 |
蛋白芯片 | 原代细胞培养 | 肝纤维化模型 |
细胞因子芯片 | 骨髓间充质干细胞培养 | 胆结石模型 |
BioPlex悬浮芯片 | 脂肪干细胞培养 | 急性胰腺炎模型 |
生长因子芯片 | 心肌成纤维细胞培养 | 急性肾衰竭模型 |
炎症因子芯片 | 软骨细胞培养 | 体内血栓模型 |
血管生成因子芯片 | 血管内皮细胞培养 | 关节炎模型 |
凋亡因子芯片 | 神经元细胞培养 | I型和II型糖尿病模型 |
趋化因子芯片 | 内皮组细胞原代培养 | 裸鼠成瘤 |
HuProt TM 20K人类蛋白组芯片 |
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基因编辑动物 |
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电生理相关服务 | 动物整体实验服务 |
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膜片钳实验 |
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细胞生物学检测 | 高通量测序 | 代谢组学 |
细胞原代培养 | mRNA测序 | 气相色谱GC/MS |
MTT检测 | LncRNA测序 | 液相色谱LC/MS |
细胞凋亡检测 | 全基因组测序 | 核磁共震NMR |
细胞周期检测 | RNA-Seq测序 |
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细胞克隆形成实验 | 外显子测序 | 影像学相关实验 |
Transwell细胞迁移/侵袭 | 16s扩增子测序 | Micro-CT |
流式分选 | Small RNA测序 | 小动物活体成像 |
CCK8/XTT检测 | 宏基因组测序 | 核磁共振 |
台盼蓝检测细胞活性 | 单细胞测序 | PET-CT |
药物筛选细胞学实验 | circleRNA测序 |
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细胞粘附性检测 | 甲基化测序 | 基因编辑动物 |
细胞划痕实验 |
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条件性敲除小鼠/大鼠 |
细胞生物学整体实验 |
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全基因敲除小鼠/大鼠 |
细胞成管实验 |
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病理检测 | CRISPR/Cas9细胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
扫描电镜 | 基因定点突变细胞系 | LncRNA芯片 |
透射电镜 | 单基因敲除细胞系 | miRNA芯片 |
HE染色 | 多基因敲除细胞系 | mRNA芯片 |
免疫组化 | 目的基因敲入细胞系 | 甲基化芯片(限人和小鼠来源样本) |
Tunel(原位末端凋亡法)检测 | 报告基因敲入细胞系 | SNP芯片(限人和小鼠来源样本) |
激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除细胞系 |
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免疫荧光 |
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Masson染色 | CRISPR/Cas9动物敲除/敲入 |
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原位杂交 | 基因敲除大鼠/小鼠 |
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荧光原位杂交 | 基因敲入大鼠/小鼠 |
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特殊染色(PSA、茜素红、阿尔新蓝等) |
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行为学检测 | 药物筛选服务项目 | 药效学评价 |
旷场实验 | 高通量自动药物筛选平台 | 抗肿瘤药物药效学评价 |
重复性刻板行为检测 | 细胞高内涵药物筛选平台 | 心血管系统药物药效学评价 |
动物跑台检测 | 蛋白质组学靶标研发平台 | 泌尿系统药物药效学评价 |
强迫游泳 | 分子药理研究平台 | 内分泌系统药物药效学评价 |
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生物膜片钳药物筛选平台 | 抗炎免疫药物药效学评价 |
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常规药物体外筛选 |
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