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动物医学实验
大鼠心肌梗死/脊髓损伤模型

时间:2020-07-17 17:06:00 浏览:664次


人类疾病的动物模型在医学科学研究方面占有十分重要的地位。威斯腾生物动物中心经过十余年的发展,累积了丰富的动物培养和模型构建经验,在动物模型构建方法上摸索出独有经验,常规动物模型构建平均成功率98%以上,重难点模型(开胸/开颅术等)构建平均成功率75%以上,形成了高效高质量的动物模型构建方法库,可成功构建上百种疾病动物模型。


SD大鼠心肌梗死模型

通过结扎左冠状动脉前降支(LAD)制作心肌梗死模型。实验鼠称重,7%水合氯醛按5ml/kg 行腹腔注射麻醉,颈部、胸部备皮,用酒精棉球对手术区消毒,颈部正中切口,钝性分离两侧肌肉暴露气管,于大鼠口腔行气管插管后接小动物呼吸机,保持呼吸稳定后在左胸前第3、4肋间作横切口,依次钝性分离各层肌肉,小心剪开肋间肌,暴露心脏后撕破心包膜,挤出心脏在左心耳的右缘下1-2mm处、肺动脉圆锥左缘处用圆针穿过左冠状动脉前降支下方的心肌表层,用5-0线结扎,结扎成功后,可观察到结扎血管以下心室壁稍变白,立即将心脏放入胸腔并缝合胸腔,用注射器将胸腔内空气抽出,确定无开放性气胸后依次缝合胸壁各层组织。大鼠术后恢复自主呼吸后拔除气管插管。


大鼠脊髓损伤实验动物模型

实验鼠自购回后动物房12h-12h昼夜交替,保持大鼠自由饮水、进食,温度23-25℃,适应性喂养一周后进入实验。

Wistar大鼠称重,采用7%水合氯醛5ml/kg腹腔注射麻醉后,俯卧位固定于手术台上,以T10棘突为中心,备皮,酒精消毒后取背部正中切口,长约2cm,依次切开皮肤、皮下组织,切开并分离脊柱两侧肌肉及筋膜,显露T9~T11椎体棘突及椎板。然后用止血钳小心咬除T10及附近棘突与椎板,暴露并保持硬脊膜的完整。用2.2×5mm弧形面与脊髓接触,压迫为质量50g的重物,压迫时间5min,大鼠双后肢瘫痪证明造模成功。逐层缝合肌肉及皮肤。

BBB(大鼠脊髓损伤)评分标准:

0分:无可见后肢运动

1分:一或两个关节轻微运动,通常为髋和/或膝关节

2分:一个关节广泛活动或一个关节广泛活动且有另一关节轻微活动

3分:两个关节广泛活动

4分:后肢全部三个关节可轻微活动

5分:两个关节轻微活动,第三个关节可广泛活动

6分:两个关节广泛活动,第三个关节可轻微活动

7分:后肢全部三个关节可广泛活动

8分:非承重情况下可以爪掌面着地

9分:间或爪掌面承重支撑或爪背面承重移动,无爪掌面支撑移动

10分:偶见爪掌面承重移动;无前后肢协调动作

11分:可较多的见到掌面承重移动,但无前后肢协调动作

12分:可较多的见到掌面承重移动,偶见前后肢协调动作

13分:常见掌面承重移动,可常见前后肢协调动作

14分:有持续性掌面承重移动和前后肢协调动作;或出现常见的掌面移动,持续型前后肢协调动作,偶有爪背侧移动

15分:持续性掌面移动和持续性前后肢协调动作,前肢前进过程中无或欧有抓地;初接触时主动爪位置与身体平行

16分:步态中可见持续性掌面移动和持续性前后肢协调动作,前肢前进过程中常见爪抓地;初接触时主动爪位置与身体平行,负重转移后旋转。

17分:步态中可见持续性掌面移动和持续性前后肢协调动作,前肢前进过程中常见爪抓地;初接触时和负重转移后主动爪位置均与身体平行。

18分:步态中可见持续性掌面移动和持续性前后肢协调动作,前肢前进过程中可持续性爪抓地;初接触时主动爪位置均与身体平行,负重转移后旋转。

19分:步态中可见持续性掌面移动和持续性前后肢协调动作,前肢前进过程中可持续性爪抓地;初接触时和负重转移后主动爪位置均与身体平行。尾巴有时或总是下垂。

20分:持续性掌面移动,持续性协调步态,足趾持续抓地,初接触时和负重转移后主动爪位置均与身体平行,躯干不稳定,尾巴持续翘起。

21分:持续性掌面移动,持续性协调步态,足趾持续抓地,活动过程中主动爪位置始终与身体平行,躯干持续稳定,尾巴持续翘起。

威斯腾实验服务流程



威斯腾生物服务项目

分子生物学检测 蛋白质与免疫学 动物实验
实时荧光定量PCR 单克隆抗体制备 帕金森疾病模型
免疫共沉淀(Co-IP 多克隆抗体制备 抑郁症动物模型
ELISA(酶联免疫吸附法)技术 Western-blot 实验服务 脊髓损伤模型
生化指标检测 蛋白双向电泳实验服务 脑外损伤模型
双荧光素酶报告基因检测 原核蛋白表达纯化 骨神经损伤模型
染色质免疫共沉淀(ChIP 真核蛋白表达纯化 心肌缺血模型
GST pull Down ITRAQ定量蛋白质组学 心力衰竭模型
SLAC蛋白组学 肺动脉高血压动物模型
高血压模型
病毒包装 实验课题整体外包 粥样动脉硬化模型
过表达/干扰慢病毒包装纯化 整体课题外包 大脑中动脉阻塞模型
过表达/干扰腺病毒包装纯化 细胞整体实验外包 慢性之气管炎模型
逆转录病毒包装纯化 动物整体实验外包 过敏性哮喘模型
腺相关病毒包装纯化 肺炎大鼠模型
肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片 原代细胞培养 肝纤维化模型
细胞因子芯片 骨髓间充质干细胞培养 胆结石模型
BioPlex悬浮芯片 脂肪干细胞培养 急性胰腺炎模型
生长因子芯片 心肌成纤维细胞培养 急性肾衰竭模型
炎症因子芯片 软骨细胞培养 体内血栓模型
血管生成因子芯片 血管内皮细胞培养 关节炎模型
凋亡因子芯片 神经元细胞培养 I型和II型糖尿病模型
趋化因子芯片 内皮组细胞原代培养 裸鼠成瘤
HuProt TM 20K人类蛋白组芯片 基因编辑动物
电生理相关服务 动物整体实验服务
膜片钳实验
细胞生物学检测 高通量测序 代谢组学
细胞原代培养 mRNA测序 气相色谱GC/MS
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细胞周期检测 RNA-Seq测序
细胞克隆形成实验 外显子测序 影像学相关实验
Transwell细胞迁移/侵袭 16s扩增子测序 Micro-CT
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CCK8/XTT检测 宏基因组测序 核磁共振
台盼蓝检测细胞活性 单细胞测序 PET-CT
药物筛选细胞学实验 circleRNA测序
细胞粘附性检测 甲基化测序 基因编辑动物
细胞划痕实验 条件性敲除小鼠/大鼠
细胞生物学整体实验 全基因敲除小鼠/大鼠
细胞成管实验
病理检测 CRISPR/Cas9细胞敲除/敲入 基因芯片
扫描电镜 基因定点突变细胞系 LncRNA芯片
透射电镜 单基因敲除细胞系 miRNA芯片
HE染色 多基因敲除细胞系 mRNA芯片
免疫组化 目的基因敲入细胞系 甲基化芯片(限人和小鼠来源样本)
Tunel(原位末端凋亡法)检测 报告基因敲入细胞系 SNP芯片(限人和小鼠来源样本)
激光共聚焦 miRNA/LncRNA敲除细胞系
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