一、激光共聚焦显微镜

激光扫描共聚焦显微镜是采用激光作为光源，在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置，并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。主要系统包括激光光源、自动显微镜、扫描模块（包括共聚焦光路通道和针孔、扫描镜、检测器）、数字信号处理器、计算机以及图象输出设备（显示器、彩色打印机）等。通过激光扫描共聚焦显微镜，可以对观察样品进行断层扫描和成像。因此，可以无损伤的观察和分析细胞的三维空间结构。同时，通过激光扫描共聚焦显微镜也是活细胞的动态观察、多重免疫荧光标记和离子荧光标记观察的有力工具。

仪器名称：激光共聚焦显微镜

英文名：Leica TCS SP2 AOBS

型号与规格：TCS SP2 AOBS

二、激光共聚焦显微镜组成

1、共聚焦扫描系统
（1）独立双向扫描镜。可以在正置显微镜和倒置显微镜之间迅速互换。仪器永久不用校正；可调的计算机控制单共焦针孔、孔径20～600μm
（2）光谱扫描区400～850nm
（3）单线扫描频率≥2000线/秒
（4）图扫描率≥3幅/秒512×512pixels；≥20幅/秒512×32pixels
（5）扫描分辨率4096*4096扫描放大1～32X；多方位序列扫描方式；任意形状区域扫描-范围：≥22mm。
（6）光谱斜陡率 ≤1％
（7）透射光检测器用于微分干涉相衬法检验
（8）低噪音 冷却型光电倍增管（PNT）控测器12bi
2、激光装置
具有多通道AOTF（四通道，八谱线），连接四种不同波长的可见光激光可以自动选择激光谱线和功率，具等待功能。光纤耦合连接低能量激光。目前使用五激光，八谱线。Ar激光发生器 （458nm/5mw，476nm/5mw，488nm/20mw，514nm/20mw）-蓝；He/Ne激光发生器（543nm/1.2mw）-绿；He/Ne激光发生器（633nm/10mw，594nm/2mv）-红，紫外激光发生器（405nm/25mv）
3、显微镜：DMIRE2倒置电动荧光显微镜，拥有10x，20x，40x干镜以及63x，100x油镜。配置电动编码物镜转座，Z轴电动驱动和干涉相衬的编码棱镜转轮。
4、计算机工作站
WindowsXP操作系统，8个同步接收器通道，12bit同步数字转换，超宽的SCSI电脑介面，高性能的电脑工作站，两个监视器，计算机彩色显示

主要附件和功能：

观察细胞精细结构。用于检测各种染色，非染色和荧光标记的组织和细胞等，在可见光范围内荧光的定位定量分析，组织光学切片，基因染色体定位，基因亚细胞定位，离子通道研究．

三、检测的优势

与传统光学显微镜相比，主要解决了生物样品结构相互重叠影响观察的问题，并可形成清晰的三维图象。在检测方面的主要优势有：

1、对活细胞和组织或细胞切片进行连续扫描，可获得精细的单个或一群细胞或者观察到局部组织的各个层面结构（包括细胞特异结构—细胞骨架、染色体、细胞器和细胞膜系统，样品的深层结构）的三维图像。

2、细胞内离子荧光标记，单标记或三奈记，检测细胞内如PH和钠、钙、镁等离子浓度的比率测定及动态变化。

3、荧光标记探头标记的活细胞或切片标本的活细胞生物物质，膜标记、免疫物质、免疫反应、受体或配体，核酸等观察；可以在同一张样品上进行同时多重物质标记，同时观察；

4、荧光检测快、激发光强度精确控制、光漂白和荧光淬灭作用小；

5、对细胞检测无损伤、精确、准确、可靠和优良重复性；数据图象可及时输出或长期储存。

四、样品要求

样品制备无特殊要求；各种染色、非染色、荧光标记的组织（包括活组织）、培养细胞、粘附细胞、细胞涂片、石蜡切片、冰冻切片。

五、应用领域

1、细胞生物学：细胞结构、细胞骨架、细胞膜结构、流动性、受体、细胞器结构和分布变化、细胞凋亡；

2、生物化学：酶、核酸、FISH（荧光原位杂交）、受体分析

3、药理学：药物对细胞的作用及其动力学；

4、生理学：膜受体、离子通道、细胞内离子含量、分布、动态；

5、遗传学和组胚学：细胞生长、分化、成熟变化、细胞的三维结构、染色体分析、基因表达、基因诊断；

6、神经生物学：神经细胞结构、神经递质的成分、运输和传递、递质受体、离子内外流、 神经组织（如大脑皮质）结构、细胞分布；

7、微生物学和寄生虫学：细菌、寄生虫形态结构（表面和内部结构）；

8、病理学及病理学临床应用：活检标本的快速诊断、肿瘤诊断、自身免疫性疾病的诊断，HIV，宫颈上皮细胞涂片诊断；

9、生物学、免疫学、环境医学和营养学；

六、服务流程

威斯腾生物服务项目

分子生物学检测	蛋白质与免疫学	动物实验
实时荧光定量PCR	单克隆抗体制备	帕金森疾病模型
免疫共沉淀（Co-IP）	多克隆抗体制备	抑郁症动物模型
ELISA（酶联免疫吸附法）技术	Western-blot 实验服务	脊髓损伤模型
生化指标检测	蛋白双向电泳实验服务	脑外损伤模型
双荧光素酶报告基因检测	原核蛋白表达纯化	骨神经损伤模型
染色质免疫共沉淀（ChIP）	真核蛋白表达纯化	心肌缺血模型
GST pull Down	ITRAQ定量蛋白质组学	心力衰竭模型
	SLAC蛋白组学	肺动脉高血压动物模型
		高血压模型
病毒包装纯化	实验课题整体外包	粥样动脉硬化模型
过表达/干扰慢病毒包装纯化	整体课题外包	大脑中动脉阻塞模型
过表达/干扰腺病毒包装纯化	细胞整体实验外包	慢性之气管炎模型
逆转录病毒包装纯化	动物整体实验外包	过敏性哮喘模型
腺相关病毒包装纯化		肺炎大鼠模型
		肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片	原代细胞培养	肝纤维化模型
细胞因子芯片	骨髓间充质干细胞培养	胆结石模型
生长因子芯片	脂肪干细胞培养	急性胰腺炎模型
信号通路磷酸化水平检测芯片	心肌成纤维细胞培养	急性肾衰竭模型
BioPlex悬浮芯片	软骨细胞培养	体内血栓模型
生长因子芯片	血管内皮细胞培养	关节炎模型
炎症因子芯片	神经元细胞培养	I型和II型糖尿病模型
血管生成因子芯片	内皮组细胞原代培养	裸鼠成瘤
凋亡因子芯片		基因编辑动物
趋化因子芯片	电生理相关服务	动物整体实验服务
HuProt TM 20K人类蛋白组芯片	膜片钳实验
细胞生物学	高通量测序	代谢组学
细胞原代培养	mRNA测序	气相色谱GC/MS
MTT检测	LncRNA测序	液相色谱LC/MS
细胞凋亡检测	全基因组测序	核磁共震NMR
细胞周期检测	RNA-Seq测序
细胞克隆形成实验	外显子测序	影像学相关实验
Transwell细胞迁移/侵袭	16s扩增子测序	Micro-CT
流式分选	Small RNA测序	小动物活体成像
CCK8/XTT检测	宏基因组测序	核磁共振
台盼蓝检测细胞活性	单细胞测序	PET-CT
药物筛选细胞学实验	circleRNA测序
细胞粘附性检测	甲基化测序	基因编辑动物
细胞划痕实验		条件性敲除小鼠/大鼠
细胞生物学整体实验		全基因敲除小鼠/大鼠
细胞成管实验
病理学检测	CRISPR/Cas9细胞敲除/敲入	基因芯片
扫描电镜	基因定点突变细胞系	LncRNA芯片
透射电镜	单基因敲除细胞系	miRNA芯片
HE染色	多基因敲除细胞系	mRNA芯片
免疫组化	目的基因敲入细胞系	甲基化芯片（限人和小鼠来源样本）
Tunel（原位末端凋亡法）检测	报告基因敲入细胞系	SNP芯片（限人和小鼠来源样本）
激光共聚焦	miRNA/LncRNA敲除细胞系
免疫荧光
Masson染色	CRISPR/Cas9动物敲除/敲入
原位杂交	基因敲除大鼠/小鼠
荧光原位杂交	基因敲入大鼠/小鼠
特殊染色（PSA、茜素红、阿尔新蓝等）
行为学检测	药物筛选服务项目	药效学评价
水迷宫实验	高通量自动药物筛选平台	神经系统药物药效学评价
旷场实验	细胞高内涵药物筛选平台	抗肿瘤药物药效学评价
重复性刻板行为检测	蛋白质组学靶标研发平台	心血管系统药物药效学评价
动物跑台检测	分子药理研究平台	泌尿系统药物药效学评价
强迫游泳	生物膜片钳药物筛选平台	内分泌系统药物药效学评价
	常规药物体外筛选	抗炎免疫药物药效学评价

【本平台合作项目】

分子生物学、细胞生物学、病理染色检测、细胞敲除&敲入、模式与转基因动物、SPF动物保种、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、SiRNA与纳米载药、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务！

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