时间:2020-07-21 13:35:00 浏览:3815次
单链DNA (寡核苷酸)短片段的引物在生物技术领域如PCR 扩增、DNA 测序等实验中,具有非常重要的作用。威斯腾生物技术服务中心拥有多年的引物合成经验,熟练的专业技术人员,采用国际先进的DNA 合成仪,能为客户精确合成各种类型的引物。
严格的质量控制:为了保证引物的质量和通量,金斯瑞配备了多台先进的DNA合成仪,可以高质高效地为客户精确合成各种类型的引物;金斯瑞也通过自动处理订单,有效地避免了人为失误,并提供RPC、PAGE、HPLC等多种纯化方式,所有产品经过严格的质量抽检后才发货给客户。
30多种引物标记服务:对引物进行荧光标记是分子生物学常用的研究手段,金斯瑞可以为客户提供5' 或3' FAM、5'
HEX等30多种引物荧光标记服务。
引物合成周期短:几乎所有引物的合成交货时间不超过5个工作日。
合成能力:长度可达110 base。
发货时间:从安排订单之日起,4天内发货。
纯化方式:RPC纯化、PAGE纯化、HPLC纯化。
合成报告:随产品提供OD值、nmol数、分子量、Tm值等数据报告。
二、引物纯化:
C18柱脱盐 |
又称为简易反相柱,对DNA有特异性吸附,可被有机溶液洗脱,但不会被水洗脱,因此能有效地去除盐分,但不能有效去除比目的片段短的小片段。该方法一般不会对普通PCR反应产生影响。对于需要用于测序、克隆的引物不能使用这个级别。 |
RPC纯化 |
RPC纯化是通过反相净化滤芯 (Reverse Phase Cartridge) 对引物进行纯化,纯化原理与反相HPLC纯化一样。与反相HPLC比较,RPC是一种有效并且更加经济的纯化方式。反相净化滤芯通常包含一种疏水基质如 C18的硅胶,能够很好的吸附DNA,并且可以用水轻松地将切割下来的保护基团和短的引物片段从反相柱上洗掉。RPC纯化的引物可以应用于DNA测序、 PCR及基因合成等。 |
PAGE纯化 |
PAGE纯化法是使用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,对引物DNA进行分离,然后从凝胶中回收目的DNA。PAGE纯化法也是一种非常有效的DNA纯化方法,纯化后的DNA纯度大于90%,对长链Oligo DNA (大于50 mer)的纯化特别有效。 |
HPLC纯化 |
HPLC纯化是使用高效液相色谱的原理,对引物DNA进行纯化。该方法用于分离纯化或分析时能达到很高的纯度和灵敏度。在引物DNA的分析和纯化中,常用的有离子交换(ion-exchange)HPLC和反相(reverse-phase)HPLC。reverse phase HPLC:纯度大于90%;ion exchange HPLC:纯度大于95%,可以有效的去除N-1短片段。HPLC纯化主要用于短链和修饰引物的纯化。该法的缺点是成本较高,批量生产效率不高。
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三、修饰引物:
基团修饰:硫代修饰,稀有碱基(dI、dU),修饰基团(氨基、生物素、地高辛、巯基、磷酸化)。
荧光标记:FAM、TAMRA、FITC、TET、HEX、Cy3、Cy5等标记。
双标记荧光探针:探针5' 端标记荧光基团,3' 端标记淬灭基团,采用组合纯化方式,保证了探针的质量。
分子信标:呈发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针,两端的核酸序列互补配对,一端标记荧光基团,另一端标记淬灭基团,自由状态下两个基团靠近,荧光淬灭;与靶序列结合,分子信标构型改变,恢复荧光。
四、实验周期
3-5个工作日
五、威斯腾服务流程:
六、威斯腾生物服务项目:
分子生物学检测 | 蛋白质与免疫学 | 动物实验 |
实时荧光定量PCR | 单克隆抗体制备 | 帕金森疾病模型 |
免疫共沉淀(Co-IP) | 多克隆抗体制备 | 抑郁症动物模型 |
ELISA(酶联免疫吸附法)技术 | Western-blot 实验服务 | 脊髓损伤模型 |
生化指标检测 | 蛋白双向电泳实验服务 | 脑外损伤模型 |
双荧光素酶报告基因检测 | 原核蛋白表达纯化 | 骨神经损伤模型 |
染色质免疫共沉淀(ChIP) | 真核蛋白表达纯化 | 心肌缺血模型 |
GST pull Down | ITRAQ定量蛋白质组学 | 心力衰竭模型 |
SLAC蛋白组学 | 肺动脉高血压动物模型 | |
高血压模型 | ||
病毒包装纯化 | 实验课题整体外包 | 粥样动脉硬化模型 |
过表达/干扰慢病毒包装纯化 | 整体课题外包 | 大脑中动脉阻塞模型 |
过表达/干扰腺病毒包装纯化 | 细胞整体实验外包 | 慢性之气管炎模型 |
逆转录病毒包装纯化 | 动物整体实验外包 | 过敏性哮喘模型 |
腺相关病毒包装纯化 | 肺炎大鼠模型 | |
肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
蛋白芯片 | 原代细胞培养 | 肝纤维化模型 |
细胞因子芯片 | 骨髓间充质干细胞培养 | 胆结石模型 |
生长因子芯片 | 脂肪干细胞培养 | 急性胰腺炎模型 |
信号通路磷酸化水平检测芯片 | 心肌成纤维细胞培养 | 急性肾衰竭模型 |
BioPlex悬浮芯片 | 软骨细胞培养 | 体内血栓模型 |
生长因子芯片 | 血管内皮细胞培养 | 关节炎模型 |
炎症因子芯片 | 神经元细胞培养 | I型和II型糖尿病模型 |
血管生成因子芯片 | 内皮组细胞原代培养 | 裸鼠成瘤 |
凋亡因子芯片 | 基因编辑动物 | |
趋化因子芯片 | 电生理相关服务 | 动物整体实验服务 |
HuProt TM 20K人类蛋白组芯片 | 膜片钳实验 | |
细胞生物学 | 高通量测序 | 代谢组学 |
细胞原代培养 | mRNA测序 | 气相色谱GC/MS |
MTT检测 | LncRNA测序 | 液相色谱LC/MS |
细胞凋亡检测 | 全基因组测序 | 核磁共震NMR |
细胞周期检测 | RNA-Seq测序 | |
细胞克隆形成实验 | 外显子测序 | 影像学相关实验 |
Transwell细胞迁移/侵袭 | 16s扩增子测序 | Micro-CT |
流式分选 | Small RNA测序 | 小动物活体成像 |
CCK8/XTT检测 | 宏基因组测序 | 核磁共振 |
台盼蓝检测细胞活性 | 单细胞测序 | PET-CT |
药物筛选细胞学实验 | circleRNA测序 | |
细胞粘附性检测 | 甲基化测序 | 基因编辑动物 |
细胞划痕实验 | 条件性敲除小鼠/大鼠 | |
细胞生物学整体实验 | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
细胞成管实验 | ||
病理学检测 | CRISPR/Cas9细胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
扫描电镜 | 基因定点突变细胞系 | LncRNA芯片 |
透射电镜 | 单基因敲除细胞系 | miRNA芯片 |
HE染色 | 多基因敲除细胞系 | mRNA芯片 |
免疫组化 | 目的基因敲入细胞系 | 甲基化芯片(限人和小鼠来源样本) |
Tunel(原位末端凋亡法)检测 | 报告基因敲入细胞系 | SNP芯片(限人和小鼠来源样本) |
激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除细胞系 | |
免疫荧光 | ||
Masson染色 | CRISPR/Cas9动物敲除/敲入 |
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原位杂交 | 基因敲除大鼠/小鼠 |
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荧光原位杂交 | 基因敲入大鼠/小鼠 | |
特殊染色(PSA、茜素红、阿尔新蓝等) |
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行为学检测 | 药物筛选服务项目 | 药效学评价 |
水迷宫实验 | 高通量自动药物筛选平台 | 神经系统药物药效学评价 |
旷场实验 | 细胞高内涵药物筛选平台 | 抗肿瘤药物药效学评价 |
重复性刻板行为检测 | 蛋白质组学靶标研发平台 | 心血管系统药物药效学评价 |
动物跑台检测 | 分子药理研究平台 | 泌尿系统药物药效学评价 |
强迫游泳 | 生物膜片钳药物筛选平台 | 内分泌系统药物药效学评价 |
常规药物体外筛选 | 抗炎免疫药物药效学评价 |
【本平台合作项目】
分子生物学、细胞生物学、基因敲出/入、模式动物、SPF动物保种、病理学检测、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、SiRNA与纳米载药、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务!
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