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成功案例
细胞生物学功能和机制研究

时间:2020-08-05 10:38:00 浏览:440次

实验方案

一、研究对象H9C2细胞株

二、研究药物1种测试药

H9C2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxiareoxygenationH/R)模型的构建

遵守快融的原则。先将水浴锅调至37℃,从液氮罐里拿出冻存管迅速投入37℃温水中,并轻轻摇动使其内容物迅速融化(最好在1 min以内),取出冻存管,微微上下晃动冻存管,用75%酒精消毒后开启,用吸管吸出溶解后的细胞悬液,注入离心管并加入5mL的含10%胎牛血清(FBS)的细胞培养液。以1000rpm离心5min,除去上清液,加入1 mL培养液吹打,使其形成悬浮液。用含20%FBS的细胞培养液适当稀释后,接种到培养瓶,置于37℃、饱和湿度、5%CO2孵箱中培养,24h后更换一次培养液,随后视细胞生长情况及培养液颜色(一般待培养液变黄)更换培养液,继续培养。 5% CO295 %N2孵箱中培养4h以模拟缺血环境,而后将细胞置于含 10%胎牛血清的高糖DMEM培养基中常规培养24h,模拟再灌注环境。

药物****对缺氧/复氧心肌细胞模型的生物学功能的影响与机制研究

(一)CCK-8检测药物处理对心肌细胞缺氧/复氧的影响

(二)QPCR检测Y基因的表达水平。

(二)Western Blot检测x蛋白的表达水平。

(四)流式细胞仪检测各组细胞凋亡水平。


结果展示

1、CCK-8检测药物处理对心肌细胞缺氧/复氧的影响

2、药物****对缺氧/复氧心肌细胞模型的生物学功能的影响与机制研究